Университет имел два отделения: историко-филологическое и физико-математическое с 13 кафедрами. Среди преподавателей числился и выдающийся архитектор Викентий Беретти, конкурсный проект которого в 1837 году послужил началом строительства здания по Большой Владимирской улице.

Это здание является одним из прекраснейших образцов российской классической школы первой половины XIX столетия, не только в городе Киеве, но и во всей Украине. Его красно-черная изысканность соответствовала количеству ленточек ордена Святого Владимира, чьё имя ему был присвоено.

Внушительное и гармоничное строение университета, как и другое творение Беретти – Институт благородных девиц (известный ныне как Октябрьский дворец), преобразили патриархальный облик Киева, стали отправными точками освоения новых городских районов. Но их строитель безвременно скончался, не окончив свой труд. Завершать дело отца пришлось сыну, молодому академику архитектуры Александру Беретти.

В середине XIX столетия университет стал выдающимся центром науки и передовой общественно-политического мировоззрения в Украине. Здесь читали лекции многие выдающиеся учёные. На протяжении 1845-47 годов сотрудником Археологической Комиссии при университете работал Тарас Григорьевич Шевченко. В университете обучались и некоторые члены Кирилло-мефодиевского братства. Их идеологическим вдохновителем был Шевченко.

Среди выпускников университета – целая плеяда славных мировых имён. Это и микробиолог Дмитрий Заболотный, и математики Чеботарёв, Шмидт, доктора Яновский и Стражеско, историк Тарле, писатели Ивашкевич, Булгаков, Корнейчук, Рыльский, композиторы Лысенко, Ревуцкий. Тут обучались художник Ге, писатель Паустовский, учёный Богомолец.

В настоящее время университет насчитывает свыше 18 тысяч студентов